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濒危植物香果树(Emmenopterys henryi)SRAP反应体系的建立与引物筛选

时间:2018年04月11日 点击:

论文题目

濒危植物香果树(Emmenopterys henryi)SRAP反应体系的建立与引物筛选

论文作者

牛艳丽1*、彭焱松1、宋莉1、周赛霞1、魏宗贤1、宋满珍1、黄江1、张平贤2、高浦新1、杜娟1、虞志军1

刊物

分子植物育种

刊号

2017,15(8):3136-3144

摘要

以珍稀濒危植物香果树(Emmenopterys henryi)基因组DNA为研究对象,对影响SRAP-PCR反应的因素如Mg2+浓度、d NTPs浓度、Taq DNA聚合酶、引物浓度4因素进行优化。确定香果树SRAP反应体系为:20μL PCR反应体系,50 ng模板DNA,1×Buffer,2.5 mmol/L Mg2+,1 U Taq聚合酶,0.3 mmol/L d NTPs,正向和反向引物各0.3μmol/L;在香果树2份样品中进行引物初筛,利用已发表的SRAP引物,选取8条正向引物和8条反向引物,共计64对引物。从中筛选出10对重复性好,谱带清晰且稳定的引物。并将这些引物在香果树2个野生居群20份样品中进行遗传多样性分析,共得到72条扩增谱带,其中多态性谱带60条,多态性比率83.3%,平均每个引物组合产生6个多态性位点,供试材料间遗传变异相对丰富。