基于网络药理学和实验验证分析鸡血藤治疗卵巢癌的分子机制

刊物

中国中药杂志

刊号

1001-5302,CN 11-2272/R

摘要

通过网络药理学和分子对接及体外细胞实验，对鸡血藤 Spatholobi Caulis 治疗卵巢癌（ovarian cancer，OC）的 主要活性成分及其潜在的作用机制进行探讨。运用中药药理学数据库与分析平台（TCMSP）获取鸡血藤的主要活性成 分及其预测靶点，通过 GeneCards、OMIM、PharmGkb、TTD、DrugBank 数据库检索获得疾病基因。将疾病及药物预 测靶点进行交集处理，筛选出共同的潜在治疗靶点。运用 Cytoscape 3.7.1 软件构建“药物-成分-疾病-靶点”相互作用网 络图；运用 STRING 数据库构建蛋白相互作的 PPI 网络。运用 Rversion 4.0.5 进行 GO 与 KEGG 功能富集分析。分析 对接虚拟筛选的处理和优化由 Schrödinger Maestro 软件完成。该研究筛选出鸡血藤 23 个活性成分，涉及 75 个卵巢癌 靶点及 178 个相关信号通路；网络分析结果表明鸡血藤可能通过作用于 GSK3β、Bcl-2、Bax 等关键靶点，发挥抗卵 巢癌作用；分子对接结果显示 GSK3β 与活性成分樱黄素结合活性较好。最后体外实验将筛选出的鸡血藤活性成分樱 黄素对人卵巢癌细胞 SKOV3 进行核心靶点和通路的初步验证。采用 CCK-8 法检测细胞增殖情况，使用流式细胞仪检 测樱黄素对人卵巢癌细胞 SKOV3 凋亡的影响。运用 Western blot 法检测樱黄素靶点及相关调控蛋白的表达。体外细 胞实验证明，樱黄素对卵巢癌细胞的增殖有明显的抑制作用，并且樱黄素对 SKOV3 有诱导凋亡的作用。Western blot  实验结果表明，樱黄素可以通过抑制 GSK3β 磷酸化的发生，调控下游 Bcl-2、Bax 蛋白的表达，诱导 SKOV3 细胞凋 亡的发生。该研究揭示了网络药理学预测并指导实验设计的科学性，证实樱黄素可通过阻断 GSK3β/Bcl-2/Bax 细胞信 号转导通路治疗卵巢癌，为鸡血藤治疗卵巢癌的机制研究提供依据。