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论文

基于网络药理学和实验验证分析鸡血藤治疗卵巢癌的分子机制

论文作者

朱时纯, 蔡俊, 吴承玉, 程春松

刊物

中国中药杂志

卷页

第47卷第3期

摘要

通过网络药理学和分子对接及体外细胞实验,对鸡血藤Spatholobi Caulis 治疗卵巢癌(ovarian cancer,OC)的主要活性成分及其潜在的作用机制进行探讨。运用中药药理学数据库与分析平台(TCMSP)获取鸡血藤的主要活性成分及其预测靶点,通过GeneCards、OMIM、PharmGkb、TTD、DrugBank 数据库检索获得疾病基因。将疾病及药物预测靶点进行交集处理,筛选出共同的潜在治疗靶点。运用Cytoscape 3. 7. 1 软件构建“药物-成分-疾病-靶点”相互作用网络图;运用STRING 数据库构建蛋白相互作用的PPI 网络。运用R 4. 0. 5 进行GO 与KEGG 功能富集分析。分析对接虚拟筛选的处理和优化由SchrödingerMaestro 软件完成。该研究筛选出鸡血藤23 个活性成分,涉及75 个卵巢癌靶点及178 个相关信号通路;网络分析结果表明鸡血藤可能通过作用于GSK-3β、Bcl-2、Bax 等关键靶点,发挥抗卵巢癌作用;分子对接结果显示GSK-3β 与活性成分樱黄素结合活性较好。最后体外实验将筛选出的鸡血藤活性成分樱黄素对人卵巢癌细胞SKOV3 进行核心靶点和通路的初步验证。采用CCK-8 法检测细胞增殖情况,使用流式细胞仪检测樱黄素对人卵巢癌细胞SKOV3 凋亡的影响。运用Western blot 法检测樱黄素靶点及相关调控蛋白的表达。体外细胞实验证明,樱黄素对卵巢癌细胞的增殖有明显的抑制作用,并且樱黄素对SKOV3 有诱导凋亡的作用。Western blot 实验结果表明,樱黄素可以通过抑制GSK-3β 磷酸化的发生,调控下游Bcl-2、Bax 蛋白的表达,诱导SKOV3 细胞凋亡的发生。该研究揭示了网络药理学预测并指导实验设计的科学性,证实樱黄素可通过阻断GSK-3β / Bcl-2/ Bax 细胞信号转导通路治疗卵巢癌,为鸡血藤治疗卵巢癌的机制研究提供依据。


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