濒危植物香果树(Emmenopterys henryi)SRAP反应体系的建立与引物筛选
论文作者 | 牛艳丽1*、彭焱松1、宋莉1、周赛霞1、魏宗贤1、宋满珍1、黄江1、张平贤2、高浦新1、杜娟1、虞志军1 |
刊物 | 分子植物育种 |
刊号 | 2017,15（8）：3136-3144 |
摘要 | 以珍稀濒危植物香果树（Emmenopterys henryi）基因组DNA为研究对象,对影响SRAP-PCR反应的因素如Mg2+浓度、d NTPs浓度、Taq DNA聚合酶、引物浓度4因素进行优化。确定香果树SRAP反应体系为:20μL PCR反应体系,50 ng模板DNA,1×Buffer,2.5 mmol/L Mg2+,1 U Taq聚合酶,0.3 mmol/L d NTPs,正向和反向引物各0.3μmol/L;在香果树2份样品中进行引物初筛,利用已发表的SRAP引物,选取8条正向引物和8条反向引物,共计64对引物。从中筛选出10对重复性好,谱带清晰且稳定的引物。并将这些引物在香果树2个野生居群20份样品中进行遗传多样性分析,共得到72条扩增谱带,其中多态性谱带60条,多态性比率83.3%,平均每个引物组合产生6个多态性位点,供试材料间遗传变异相对丰富。 |
